【作者】劉曉燕 羅振鵬 崔偉康 林漳豐 岳開華 王嵩瑞 李振方
【機構】福建農(nóng)林大學作物科學學院
摘要：為分析對地黃有較強致病性的尖孢鐮刀菌的侵染機制,本研究采用攜帶有潮霉素抗性標記的強組成型表達載體p CT74,經(jīng)PEG-Ca Cl2介導的原生質體轉化法導入鐮刀菌,獲得熒光信號強烈的s GFP標記菌株,并采用噴施接種和根部灌根接種。研究發(fā)現(xiàn)鐮刀菌首先在地黃外部聚集繁殖,并通過傷口或氣孔等通道侵入地黃維管組織,后逐漸導致周圍海綿組織破裂,進而致使地下根莖逐漸變黑腐爛;由于地黃葉部氣孔發(fā)達,使得鐮刀菌由葉部侵入速度要快于根部灌根接種;不同孢子濃度接種實驗表明鐮刀菌對寄主的致害程度與其在葉部與根部的接種濃度并不呈相關性。進一步在接種處理后采集地黃葉部、莖部和根部組織提取真菌DNA后進行PCR擴增發(fā)現(xiàn):在根部接種60h后即能檢測到鐮刀菌的侵入,經(jīng)84h后侵入到地黃莖部組織,經(jīng)96h后侵入到地黃葉部組織。該標記菌株可為今后探索地黃連作栽培中真菌病害大規(guī)模爆發(fā)的根際生物學過程提供研究材料。
基金：國家自然科學基金(31201694)； 福建省教育廳科技項目(JA13474)~~；
關鍵詞：地黃; 尖孢鐮刀菌; 連作障礙; 綠色熒光蛋白;